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20180125 期末報告

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1. 請選出一個跟你論文主題相關的基因 (gene X)。     選用 Formyltertrahydrofolate Synthetase(FTHFS) 基因,為共營乙酸氧化菌氧化乙酸過程中關鍵酵素的基因 -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 2. 將 gene X 於 Pubmed 或相關文獻探勘軟體,進行篇數,年代,作者趨勢分析。     根據我對於此基因的了解,分別選'用了fhs、fthfs及formyltertrahydrofolate synthetase作為搜尋關鍵字,設定搜尋目標為近十年內的文獻,發現在pubmed搜尋中,利用fhs作為關鍵字主要會搜尋到"Family Health Strategy"所以這個關鍵字在此是不是用的,利用formyltertrahydrofolate synthetase 則是在前20篇文獻中,出現6篇我所感興趣的;而用fthfs搜尋總共出現21筆資料,都是和SAOB有關的文獻因此用fthfs搜尋是最能target到目標的。而近十年只有21篇文章,所以幾乎可依說是沒有趨勢可言。總體而言就是研究此課題的團隊相對較少,目前研究不多。 -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 3. 將 gene X 利用 NCBI Gene 入口,獲得相關序列資訊(包括 genomic, reference sequence, peptide sequence)     直接選用Clostridium ultunense 這株已知的SAOB基因,找其中FTHFS基因, LOCUS       LT669839 DEFINITION  [Clostridium] ultunense Esp isolate Clostridium ultunense strain      

PyMol進階練習

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1.2AVU 先做出這個圖 接著輸入指令 create A, chain A create B, chain B create C, chain C create D, chain D create E, chain E create F, chain F 再點選all→H(Hide)→hide everything 點選C→show→stick 點選D→show→sphere,輸入指令set sphere_scale, 0.4 點選A→show→surface 點選B→show→cartoon 點選F→show→cartoon 點選E→show→ribbon 再將背景調成白色即完成 2.4LMY 打開檔案先點選all的Hide→nonbounded 調整一下位置後,調整Color 選取 紫色sequence 104、107、144、147 位置 Show=>side chain=>stick Show=> mian chain =>stick 點選球( Zn),指令 set sphere_scale, 0.5 改變一下顏色 調整位置 選取紫色位置4、6、15、19、97、99, Show=>side chain=>stick Show=> mian chain =>stick 將背景弄淡 輸出圖片並編號 3. 4KC3 先轉圖及變顏色 (顏色: blue→slate&magenta→pink) 再輸入指令 rotate y, -90 比較前後 選藍色序列22、35、38、198,粉色序列144、148、149、244 Wizard→measurment,右下會出現視窗點選"distance"→"distance" 點選序列端點,再點選相對序列的的端點,使連接並且測距離 全部完成後,點選DONE (all)點選Hide→label Display→Backgroud→White Setting→Transparency→Cartoon→60% 4. 打開3QYC與1IGM PDB檔案 Hide n

Protein structure database and the visualization tool PyMol

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ExPASy : Protein structure database 蛋白質的資料庫,裡面有很多功能,就可以都試試看 RCSBPDB 到RCSB網站搜尋 目標蛋白質 下載 ( PDB file) 才能在 PyMol打開 *此以3F8N為操作例子 打開檔案,改變蛋白顏色 指令: color X, chain Y X為reb、blue等等顏色 Y為 A、B、C、D..... 改變背景顏色

miRNA

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miRNA的Database: miRBase HW1: 由於目前沒有研究相關的miRNA,所以就到Database中搜尋一條假裝是自己的 (miRBase 首頁) 選擇人類的資料庫(因為資料較多) 流程:Browse=>Human=>Homo sapiens=>找一miRNA 隨機選一個:這次選hsa-mir-1-1點進去 到stem -loop欄位,按get sequence 之後將miRNA序列複製sequence 接著到另一個網站: RNALogo 是一個可以將miRNA圖像化的網站 將剛剛選取之miRNA圖像化: 點選CreateLogo=>for unaligned RNA sequences 將sequence貼上後,submit 得到之miRNA圖 有Stem 也有 Loop 自創一個序列: UGGGAAACAUACUUCUUUAUAUGCCCAUuuuttcgAUGGACCUGCUAAGCUAUGGAAUGUAAAGAAGUAUGUAUCUCA 期圖形是醜的 HW2: 回到miRBase 選原本選的hsa-mir-1-1 找到Mature sequence中 選 Predicted targets 可以知道這段miRNA會Bind到那些target上 選RNA2-HSA 點Submit Choice 後 選一個transcript ID,到google 搜尋 點進去後 按Show Transcript Table 選一個Refseq 會跳到 複製序列後 到 RNA22 將miRNA序列 及 剛剛複製的序列貼上 Submit 照理說會出現一張表,是miRNA會target到的位置, 但是有可能會是都沒有結果 這次我選的就剛好沒結果 所以我就嘗試別的 得到以下結果

Microarray分析軟體 Multiple experiment viewer

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1.選取檔案(MeV_4_9_0),並且開啟,開啟後會有三個視窗,黑色框框的(MeV.exe)為原始檔案,不可關閉,在位階上 exe>MultExperiment Viewer>Multiple Viewer 2.接著選取檔案,這次用的檔案是老師提供之檔(gpr),然後全部載入,這個分析軟體可以分析比較2組數據以上之關係 gpr檔案用excel打開長這樣 選取檔案流程:File>Load data>select file Loader>Other Format File>Genepix format>Browse(此處是選取目標檔案所在之資料夾,並在軟體中開啟資料夾)>add(or add all) ps.軟體版本不同,操作介面按鍵也會有所不同,若版本更新就在自己摸索一下即可 3.將data normalization ,在normalization前後,數據之數值會改變,但排位一定不變 流程:Adjust Data>Normalization>Total Intensity 點完之後圖片會立即改變(稍縱即逝,要注意看變化) HCL分析 Analysis>Clustering>HCL ·Gene tree 分析完之後點取左邊之HCL(1) 可以看到分析之結果 目前對於此分析之用途尚不清楚,只知道越紅色其相關性越高,綠色則越低 4.K-mean分析 設立分群,可以自行決定要分成幾群,但實際數據的意義,我還不是很懂,先把流程記下來,以後會懂得 流程:(要用original檔案):Analysis>Clustering>KMS ·Cluster gene ////即用基因分組,若選 sample 則是用樣本分組 V:Construct Hierarchical Trees 一樣點取KMS就可以看檔案 5.CAST 也可以由電腦決定要分成幾群,用密度法